Kako zbrati analizo urina za atipične celice. Analiza urina za citologijo - zakaj se izvaja, kaj pravijo rezultati

Namen raziskave je diagnosticirati potencialno izjemno nevarne, življenjsko nevarne tumorje sečil visoke stopnje malignosti. (HGUC). Citološko preiskavo je leta 1945 v svetovno medicinsko prakso uvedel J. Papanicolaou.

Urinarni trakt je anatomska struktura, ki opravlja funkcijo uriniranja. Sestavljen je iz ledvičnega pelvisa, sečevodov, mehurja in sečnice. Prehodni epitelij ali urotelij, ki prekriva sečila, pod določenimi pogoji postane vir neoplazem, ki so zelo raznolike, tako po morfološki zgradbi kot po stopnji malignosti. Primarni maligni tumorji ledvičnega pelvisa in sečevoda predstavljajo le 5-6% vseh urotelijskih tumorjev, zato se glavni delež življenjsko nevarne patologije pojavi pri tumorjih mehurja (Državna ustanova Ministrstva za zdravje Republike Belorusije RNPC OMR po imenu N.N. Aleksandrov "Algoritmi za diagnozo in zdravljenje malignih novotvorb", 2012).

Vsako leto v Republiki Belorusiji odkrijejo 1000-1200 novih primerov raka mehurja na različnih stopnjah razvoja. Trpi predvsem moška populacija. V evropskih državah je rak mehurja v strukturi splošne incidence raka na 4. mestu pri moških in na 14. mestu pri ženskah. V veliki večini primerov gre za urotelijski karcinom visoke stopnje (HGUC), ki se klinično kaže kot hematurija, t.j. pojav krvi v urinu. V zadnjih 20 letih se je pojavnost pri nas skoraj podvojila. Relativno visoko razmerje umrljivosti in obolevnosti (0,33) pomeni, da vsak tretji bolnik umre, kar nedvomno kaže na pomanjkanje učinkovitih neinvazivnih metod za zgodnjo diagnostiko.

V zadnjih letih znanstveniki razmišljajo o tej možnosti virusne narave raka na mehurju. Človeški polioma virus 1, bolj znan kot polioma-BK virus, že vrsto let vzbuja pozornost raziskovalcev na tem področju kot potencialno nevaren dejavnik pri razvoju neoplastičnih procesov v sečnem sistemu. Ta virus je razširjen po vsej človeški populaciji. Lahko rečemo, da je z njim okuženih do 90% odraslega prebivalstva našega planeta. Prvi sev človeškega poliomavirusa je bil izoliran iz urina leta 1971. V imenu tega seva velike latinske črke BK ustrezajo začetnicam pacienta, pri katerem so ga odkrili. In v zadnjih dveh desetletjih se je naše razumevanje vloge tega virusa resno razvilo. Ni zanikati, da je ob zmanjšanju imunološke zaščite, namreč med citostatsko terapijo pri bolnikih s transplantirano ledvico, virus polioma BK glavni povzročitelj nefropatije alografta BKV, stenoze sečnice in hemoragičnega cistitisa (Drachenberg CB, Hirsch HH, Ramos E, Papadimitriou). JC (2005).

Virus vstopi v človeško telo skozi zgornja dihala in vztraja dolgo asimptomatsko, predvsem v uroteliju, pa tudi v kostnem mozgu, kar povzroča latentno okužbo. Zdrav imunski sistem nadzoruje asimptomatsko prisotnost virusa v človeškem telesu. Ko pa je imunski nadzor oslabljen, do česar pride iz takšnih ali drugačnih razlogov, zaradi supresije delovanja imunskega sistema, se virus BKV aktivira. In morfološki odraz prehoda iz latentnega stanja v aktivno je pojav specifičnih celic. V urotelijskem epiteliju virusni delci tvorijo intranuklearne vključke, zaradi česar celica pridobi zelo značilne morfološke značilnosti. Prvi opis takih celic z vključki virusnih delcev je podal dr. Koss LG pred 40 leti, ko jih je odkril v urinu bolnika po presaditvi ledvice. Imenoval jih je celice vabe. Lahko so 4 tipov in do nedavnega je med citopatologi prevladovalo mnenje, da teh okuženih celic ni mogoče opredeliti kot maligne. Toda njihov pojav v urinu bolnika s presaditvijo alotransplantata je najzgodnejši znak grožnje nefropatije alotransplantata BKV. Te slike prikazujejo 4 morfološke tipe celic Decoy.

Z drugimi besedami, celice Decoy so najzgodnejši predhodniki zavrnitve presadka. Toda šele z uvedbo v prakso tekočih tehnologij za pripravo zdravila iz sveže sproščenega urina ali iz izpranega mehurja, z barvanjem po Papanicolaouju, je postalo mogoče odkriti te celice in jih razlikovati od malignih z visoko občutljivostjo in specifičnostjo. Trenutno odkrivanjeUrinarna vabljiva celica je presejalni test za BKV nefropatijo. Poleg tega pri bolnikih, ki so bili podvrženi presaditvi ledvic, skupaj s celicami Decoy urotelijske celice pogosto najdemo z znaki hude celične atipije, ki ustrezajo citomorfološkim značilnostim urotelijskega karcinoma visoke stopnje, pa tudi celice, ki hkrati nosijo značilnosti, ki so značilne za Vabne celice in celice HGUC. Te celice nimajo le mešanih lastnosti celic Decoy in malignih celic, ampak tudi prenašajo proteine ​​(SV-40 T) virusa polioma BK (Galed-Placed I, Valbuena-Ruvira L. Diagn Cytopathol. 2011 Dec;39(12) :933-7). Številni klinični primeri, opisani v literaturi, kažejo na možno onkogeno vlogo virusa polioma BK pri pojavu urotelijskega karcinoma (Hassan S, Alirhayim Z, Ahmed S, Amer S. Case Rep Nephrol.2013; 2013:858139). Proteini BKV škodljivo vplivajo na sintezo tumor supresorskih proteinov (p53), kar povzroči motnje v procesih popravljanja DNA. Ta patogenetski mehanizem je osnova za nastanek genetsko nestabilnih sprememb, ki vodijo do transformacije normalnega urotelija najprej v displastični in nato v urotelijski karcinom visoke stopnje (HGUC). Za HGUC je značilna visoka stopnja ponovitve in napredovanja v mišično invazivne stopnje T2, T3, T4 z metastazami v bezgavkah. HGUC je diagnosticiran pri 95 % vseh smrti zaradi raka na mehurju. Torej, prednosti citološkega pregleda urotelnega trakta:

• Neinvazivnost postopka (analiza iz "kozarca");
• Visoka specifičnost za diagnosticiranje HGUC, ki se približuje 100 %;
• Visoka občutljivost za diagnosticiranje HGUC ~ 80%;
• ~30-70% bolnikov s HGUC preživi;
• ~5–15 % primerov HGUC napreduje; Ameriška statistika.
• 535.000 bolnikov z rakom na mehurju je preživelo.

Prednostna tehnologija za citološko pripravo urina je tekoča sedimentacija (BD SurePath), ki jo uporabljamo v našem laboratoriju. Tankoslojni brisi omogočajo nadaljnjo diagnozo z uporabo celotnega arzenala molekularno-genetskih metod (imunocitokemija, FISH itd.).

Citološka diagnostika HGUC združuje vse genetsko nestabilne maligne urotelijske tumorje, ki so histološko zelo raznoliki. Da bi optimizirali pristope k razlagi urinske citopatologije in standardizirali diagnostične kriterije, je bil na mednarodnem kongresu v Parizu leta 2013 sprejet nov sistem citološke klasifikacije. Je zelo podoben sistemu Bethesda za citološko analizo patologije ščitnice in cervikalnega kanala.

kategorije	Pariški sistem za razvrščanje citologije urinarnega trakta	Verjetnost malignosti
jaz	Nezadovoljivo/nediagnostično gradivo	0-10%
II	Negativen na urotelijski karcinom visoke stopnje (NHGUC)	0-10%
III	Atipične urotelne celice (AUC)	8-35%
IV	Sum na rak urotelija visoke stopnje (SHGUC)	50-90%
V	Urotelijski karcinom nizke stopnje (LGUC)	~10%
VI	Urotelijski karcinom visoke stopnje (HGUC)	>90%
VII	Drugi tumorji, primarni in sekundarni	>90%

Tako je citološka preiskava urina z uporabo tehnologij za pripravo tekočih brisov in z uporabo diagnostičnih meril Pariške klasifikacije iz leta 2014 glavna neinvazivna metoda za diagnosticiranje in spremljanje urotelijskega karcinoma visoke stopnje.

Ženske so pogosto izpostavljene boleznim urinskega sistema, ki so infekcijske ali vnetne narave. To je razloženo z anatomskimi značilnostmi strukture ženske medenice. Vizualni pregled s cistoskopom ni vedno dovolj za natančno diagnozo, zato je priporočljivo opraviti citološke študije.

Citologija mehurja je diagnostični test, ki ženskam omogoča testiranje mehurja na raka.

Ta študija je predpisana v primeru suma na prisotnost malignega tumorja v organih urinskega sistema. Pogosto se bolniki, ki imajo veliko verjetnost odkrivanja rakavih celic, zatekajo k tej metodi.

Indikacije za citološki pregled

Citologija mehurja je predpisana bolnikom, ki:

• je že odkrit maligni tumor tumor organi urinskega sistema, citološke študije v tem primeru omogočajo spremljanje napredovanja bolezni;
• obstaja sum prisotnosti maligni tumorji, diagnostika omogoča prepoznavanje raka;
• prisoten krvi v urinu to služi kot signal o prisotnosti patologije, zato mora zdravnik predpisati citološko diagnozo;
• zdravljenje bolezni končano, pravočasna diagnoza omogoča oceno napredka zdravljenja in izogibanje ponovitev bolezni.

Kaj se preučuje s citologijo

Citološki pregled mehurja je mikroskopska študija sedimenta vzorca urina, pridobljenega po centrifugiranju biomateriala. To študijo opravi histolog v laboratoriju.

Namen citologije je odkriti nenormalne celice, ki se lahko izločajo z urinom. Diagnostika omogoča natančno prepoznavanje prisotnosti malignega procesa v organih urinskega sistema.

Če pa prejmete nezadovoljiv, netipičen ali sumljiv rezultat, se morate zateči k ponovnim in dodatnim testom.

Priprava na postopek

Če želite oddati vzorec urina za analizo, morate upoštevati splošna pravila, kot so vzdrževanje osebne higiene in uporaba sterilne posode za zbiranje biomateriala.

Bistvena razlika pri pripravi na citologijo je v času zbiranja in količini zbranega materiala.

Zbiranje urina se izvaja zjutraj, vendar ne takoj po prebujanju. Biomaterial za analizo se zbere približno 2 uri po tem, ko je bil mehur izpraznjen tekočine, ki se je nabrala čez noč. Če zjutraj vstanete ob 7. uri, je bolje, da takoj obiščete stranišče in opravite blato.

Izogibajte se pitju veliko tekočine, saj lahko razredčijo urin. Priporočljivo je, da vzorec takoj oddate v laboratorij, da bi dobili natančnejši rezultat testa.

Če je treba biomaterial vzeti ljudem, ki vodijo sedeč način življenja ali so resno bolni, je za takšne situacije na voljo kateter. Izvesti je treba številne higienske postopke: umijte perineum, obrišite z brisačo, namestite kateter in odvzemite vzorec urina.

Interpretacija rezultatov citološke preiskave

V vsakem laboratoriju je rezultat študije izražen z izrazi in merskimi enotami, ki se razlikujejo od tistih, pridobljenih v drugih laboratorijih. To je odvisno od opreme, uporabljene za izvedbo študije.

Rezultati diagnostike so posredovani lečečemu zdravniku, ki jih preuči in postavi diagnozo. Vendar pa obstajajo splošno sprejeti medicinski izrazi, ki se uporabljajo v vseh klinikah in laboratorijih in imajo nedvoumno razlago, ki je dostopna tudi neodvisnemu razumevanju.

Nezadovoljiv rezultat pomeni, da študija ni ugotovila števila nepravilnih celic, ki bi omogočile pravilen zaključek, zato je treba teste ponoviti.

Atipičen izvid kaže, da so bile v oddanih vzorcih ugotovljene celice netipične oblike, vendar ti podatki ne dajejo natančnega podatka o tem, ali obstajajo rakava obolenja v organih sečil. Potrebni so dodatni testi.

Sumljiv rezultat je prvi opozorilni znak. To nakazuje, da so bile odkrite sumljive celice, vendar so lahko takšne neoplazme tudi benigne.

Pozitiven rezultat pomeni, da so bile odkrite rakave celice. Kateri organ urinarnega sistema je bil podvržen raku, je mogoče ugotoviti s specialistično diagnostiko. V prihodnosti je predpisano posebno zdravljenje.

Negativen rezultat kaže, da prisotnost rakavih celic v bolnikovem telesu ni bila odkrita.

Za diagnosticiranje raka mehurja je potrebno opraviti ne le urinski test, temveč tudi študijo celotnega telesa kot celote. Nato zdravnik, ki ima v rokah vse zbrane teste, diagnosticira bolnika in izbere ustrezno zdravljenje.

Pozitiven vidik citološke diagnoze je, da se za razliko od drugih študij izvede hitro (3-5 dni), pridobljeni rezultati pa omogočajo pravočasno zdravljenje. Pogosto lahko zdravnik naroči več takih študij, da postavi natančno diagnozo in ugotovi dejstvo onkologije.

1423 0

Ko govorimo o metodah laboratorijske diagnoze zgodnje onkološke patologije v mehurju, jih je treba takoj razdeliti na rutinske metode, kot so mikroskopski in citološki pregled urinskega sedimenta, in precej zapletene biokemične, ki omogočajo prepoznavanje določenih stanj homeostaze, ne samo značilne za določeno obliko malignega tumorja, ampak in tiste, ki so pred njegovim pojavom.

Mislimo na biokemično študijo urina, ki razkriva moteno presnovo triptofana, ki se kaže v pojavu njegovih rakotvornih metabolitov v urinu.

To se lahko pojavi tako pri bolnikih z rakom mehurja kot pri praktično zdravih ljudeh, kar kaže na določeno nagnjenost k pojavu bolezni in velja za enega od endogenih dejavnikov tveganja.

Enako lahko rečemo o pomenu povečane aktivnosti β-hialuronidaze, urinskega encima, pod vplivom katerega v mehurju razpadejo nekancegeni kompleksi s sproščanjem učinkovine. Tako kompleks, sestavljen iz 2-amino-1-naftola, v kombinaciji z glukuronsko ali žveplovo kislino v jetrih, ki je izgubil svoje rakotvorne lastnosti, pod vplivom β-hialuronidaze ali urinske sulfataze razpade v mehurju s tvorbo aktivni 2-amino-1-naftol, ki rakotvorno deluje na uroepitel.

Pravočasno odkrivanje zgodnje onkološke patologije

Ko že govorimo o pravočasnem odkrivanju zgodnja onkološka patologija (ERP) v mehurju se je treba strinjati z mnenjem M. Mebel in sod. da kljub pomembnemu napredku na področju diagnostike rutinske metode - preiskava eritrociturije, preiskava dostopnih delov sečil, rektalna palpacija - ostajajo osnova zgodnje diagnostike, a očitno premalo uporabljene. Dovolj je poudariti, da pri mnogih bolnikih, ki so obiskali kliniko z neurološkimi težavami, prisotnost rdečih krvnih celic v splošni analizi urina ni bila razlog za napotitev k urologu, niti za splošne zdravnike niti za specializirani specialisti.

Medtem ko smo izvajali prospektivno epidemiološko študijo kontingenta 3.400 praktično zdravih ljudi, da bi pri njih ugotovili odpoved mehurja, smo opravili mikroskopski pregled urinskega sedimenta pri 2.143 osebah (63,0%) in citološki pregled pri 696 (20,5%). ) in razkrila pomemben odstotek patologije pri ljudeh, ki niso nameravali poiskati zdravniške pomoči, vendar se počutijo praktično zdravi.

Hematurijo so odkrili pri 18,1% moških v rizični skupini in 7,9% kontrolnih, pri ženskah 23,1 oziroma 10,7%. Seveda vsi ti ljudje potrebujejo nadaljnji urološki pregled, ki nam bo omogočil ugotoviti vzrok urološke patologije, vključno z onkološko. Pri tem je treba poudariti, da laboratorijska diagnostika zgodnje onkološke patologije v mehurju ne more biti samostojna metoda, praviloma jo je treba dopolniti s cistoskopskim pregledom z biopsijo.

Indikacije za citološko preiskavo urinskega sedimenta so vse oblike makro- in mikrohematurije, nejasna disurija, cistalgija, zloraba analgetikov in poklicni stiki z aromatskimi amini. Citološka preiskava je nepogrešljiva pri tumorjih mehurja intraepitelnega tipa - rak in situ, ki jih endoskopsko ne odkrijemo, pa tudi pri raku divertikuluma mehurja, strikturah sečnice in nizki kapaciteti organa.

Še enkrat je treba poudariti, da ta teoretično idealna metoda ne more biti neodvisna niti pri diagnosticiranju ponovnega raka na mehurju, niti še posebej pri prepoznavanju ROP. Po mnenju mnogih avtorjev to potrjuje dokaj visok odstotek odstopanj med cistoskopsko sliko in rezultati citologije urina; le pri 70,0% bolnikov z uroepitelijskim rakom citološki pregled odkrije rakave celice.

J. Tostain in sod., ki so analizirali 500 citoloških študij pri 342 bolnikih z uroepitelnimi tumorji, so pokazali, da je za tipične papilome mehurja citološki pregled neučinkovit pri infiltrativnem raku z nizko stopnjo malignosti, citologija urina omogoča postavitev diagnoze pri 66,0. % primerov, za tiste z visoko stopnjo - v 80,0%.

Številni avtorji (Mansat A. et al., Droese et al.) so ugotovili jasno povezavo med stopnjo celične anaplazije in citološko detekcijo tumorja. Zlasti je bilo ugotovljeno, da je bila pri uporabi Bergevistove klasifikacije I, II, III stopnje glede na celično anaplazijo v prvi stopnji tumor odkrit le v 19,0%, v drugi - 30,0%, v tretji - 70,0% .

Še vedno ni splošno sprejetih citoloških metod za preučevanje tumorjev mehurja. Nekateri raziskovalci menijo, da je metoda eksfoliativne citologije dragocena pri preučevanju urinskega sedimenta sveže sproščenega urina (Enokhovich V.A., 1966; O.P. Ionova et al., 1972), drugi dajejo prednost aspiracijski biopsiji (Volter D. et al, 1981), drugi kažejo da so najboljši rezultati doseženi z metodo izpiranja sluznice mehurja (Lomonosov L.Ya., 1978).

Napake pri citološki diagnozi

Napake pri citološki diagnozi določa več dejavnikov: slab material, pridobljen med vnetnim procesom ali nekrozo tumorja, njegova majhna količina ali blaga atipija celic. Zato seveda poteka iskanje najbolj racionalne izbire materiala za delo. Tako N. Holmguist opozarja na visoko stopnjo detekcije raka mehurja (1,2 na 1000) pri citološki preiskavi mokrih pripravkov urinskega sedimenta in predlaga uporabo te tehnike za presejanje.

L.Ya. Lomonosov priporoča za množične preventivne preglede skupin z visokim tveganjem metodo aktivnega izpiranja mehurja v lastni različici, ko pred izpiranjem mehur temeljito speremo s furacilinom, nato pa dajemo 50-100 ml alkoholne raztopine novokaina. stopnja 15 ml 96 ° alkohola na 100 ml 1% raztopine novokaina.

Po 5-10 minutah raztopino zberemo v čisto posodo. Po makro opisu izpiranja se material centrifugira pri 3000 obratih na minuto 15 minut in se iz centrifuge pripravi bris.

Hkrati so številni avtorji delali na racionalni tehniki priprave brisov, saj je zamuda pri uvedbi citološkega pregleda v veliki meri posledica težav pri barvanju celic v urinu. Zato S. Fiedler et al. Izvede se več barvanj - z metilen zelenim, pironinom in kromalonom po metodi, ki so jo modificirali.

Lažno pozitivni rezultati so najpogosteje povezani z nepravilno oceno urotelijskih celic z displastičnimi spremembami pri urolitiazi, kroničnem vnetnem procesu. Tako je imelo od 135 bolnikov s kamni zgornjih sečil 7,2 % citološko sliko, podobno dobro diferenciranemu raku. V urinu oseb, ki so dolgo časa trpele za urolitiazo, S. Dimopoulos et al. opazili prisotnost celic 3. in 4. stopnje malignosti po Pappanicolaouju in njihovo izginotje po kirurški odstranitvi kamnov.

O.P. Ionova et al. Med vnetnimi procesi so bile v citogramih najdene atipične celice, ki so se malo razlikovale od tumorskih celic. Zdi se, da je interpretacija citogramov precej težka, zato morda še vedno ni splošno sprejetih meril za malignost epitelijskih tumorjev mehurja.

Razpoložljivi številni podatki o tem vprašanju se nanašajo predvsem na diagnozo recidivov raka in precej redke primere prepoznavanja "raka v celici" - raka in situ. Le nekaj avtorjev je opisalo citograme za enostavne in proliferirajoče papilome mehurja - G.A. Arzumanyan, V.A. Enohovič, O.P. Ionova et al., L.Ya. Lomonosov.

Številni drugi - M. Beyer-Boon et al. kažejo, da papiloma sploh ni mogoče diagnosticirati na podlagi citogramov; slednji se pri tipičnih papilomih ne razlikujejo od normogramov in le odkrivanje fragmentov papilarnega tumorja omogoča postavitev diagnoze.

Dejstvo je, da so citogrami izpiranja mehurja običajno revni s celičnimi elementi. Večina najdenih celic so celice integumentarne cone prehodnega epitelija. So velike, poligonalne ali podolgovate oblike. Jedrca so majhna, okrogla ali ovalna, nameščena sredinsko ali rahlo ekscentrično.

Celice vmesne cone so cilindrične oblike, razporejene bodisi v obliki papilarnih praproti podobnih struktur, bodisi v obliki rozet ali v obliki grozdnih grozdov. Jedra so ovalna, kromatin je drobno grudast, enakomerno razporejen po površini jedra. V nekaterih študijah pozornost pritegnejo velikanske večjedrne celice s pogostimi mitotičnimi številkami, značilnimi za pranje.

Od neepitelnih elementov najdemo eritrocite, levkocite in kristale soli. V delu A.V. Zhuravleva poudarja, da izpiranje običajno ne sme vsebovati oblikovanih elementov. Med vnetjem se poveča število celičnih elementov zaradi celic vmesnega in bazalnega območja, prehodnega epitelija in celic vnetne narave.

V brisih tipičnega papiloma najdemo celice enake velikosti: cilindrične, ovalne, okrogle in vretenaste oblike. Lahko se pojavijo celice z repom. Njihova jedra so monomorfna s kompaktno strukturo kromatina in vsebujejo 1-2 nukleola. Jedrsko-citoplazmatsko razmerje ni moteno.

Po mnenju G.A. Arzumanyan, je značilna odsotnost večjedrnih celic, značilnih za zgornjo, diferencirano plast prehodnega epitelija. M.P. Ptokhov meni, da je najbolj značilna lastnost prisotnost podolgovatih repnih celic.

Citološka merila za malignost papiloma

Za citograme proliferirajočih papilomov je značilen izrazitejši polimorfizem in polikromazija celic. Jedra se povečajo, število nukleolov v njih se poveča. V.A. Enochovich ugotavlja prisotnost ovalnih in okroglih tumorskih celic, značilnih za to skupino papilomov. N. Hanschke ugotavlja veliko število dvojedrnih celic.

L.Ya. Lomonosov identificira naslednja citološka merila za malignost papiloma:

Povečana mitotična aktivnost celic;
polimorfizem jeder z grobostjo strukture;
zmanjšanje vsebnosti glikogena v citoplazmi;
povečanje celičnih plasti za več kot pet.

Opozarja, da je včasih začetno malignost lažje odkriti v citogramih kot v histoloških preparatih.

Pri prehodnem celičnem karcinomu mehurja vsi avtorji ugotavljajo polimorfizem, polikromazijo citogramskih celic, kršitev jedrsko-citoplazemskega razmerja v korist jedra in spremembe v strukturi kromatina. hipertrofija in hiperplazija nukleolov ter distrofične spremembe v citoplazmi. B.L. Polonsky in G.A. Arzumanyan meni, da je multinukleacija celic značilna za raka.

Seveda mora takšno študijo opraviti izkušen specialist in zahteva relativno dolgo časa. Zato so, da bi jo spremenili v avtomatsko presejalno metodo, začeli uporabljati pulzno citopotometrijo, ki omogoča štetje 1000 celic, obarvanih s fluorescenčnim barvilom v eni sekundi.

Številna dela (Klein F. in sod., 1982; Frankfurt O. in sod., 1984; Dean P. in sod., 1986) kažejo na obetavno vlogo v diagnostičnem odnosu stanja citološke preiskave urina in metoda pretočne citometrije, pri kateri se meri vsebnost DNK, RNK in velikost jedra.

Pulzna citopotometrija je bila uporabljena za kvantitativno preučevanje DNK in proteinov v epitelijskih celicah prosto tekočega urina, vzorcev lavaže mehurja in suspenzij iz tumorskega tkiva. Tako je bila ugotovljena povezava med prisotnostjo anevploidnih celic v izpirkih mehurja in razvojem invazij pri bolnikih.

Ugotovljeno je bilo, da je večina površinskih tumorjev mehurja diploidnih, invazijo pa spremlja aneuploidija. Zato je pretočna citometrična analiza vsebnosti DNA kvantitativno merilo za napovedovanje stopnje malignosti tumorja, pa tudi za diagnosticiranje raka in situ.

V delu K. Nielsena je podana stereološka ocena volumna jeder ileuma mehurja v normalnih in malignih procesih. Avtor je pregledal 27 biopsij iz mehurja: 10 - normalno, 5 - z okužbo, 12 - s tumorji. Z morfometrično študijo je bil ugotovljen povprečni volumen jedra v normalnih pogojih in med okužbo 133 in 182 µm3, pri raku in situ pa 536 µm3.

Test, ki ga ponuja podjetje "CYTODIAGNOSTICA", ki temelji na kvantitativnem določanju fluorescence, lahko pomaga identificirati celice s povečano vsebnostjo DNA. Uporabljeno barvilo veže celice z visoko vsebnostjo DNK in ta okoliščina omogoča identifikacijo ene rakave celice med tisočimi normalnimi. Podjetje predlaga uporabo tega testa za presejanje populacij s povečanim tveganjem za raka na mehurju.

Vendar je treba opozoriti, da uporaba predlaganih metod za preprečevanje tumorjev mehurja naleti na velike težave, ki se začnejo takoj, že med zbiranjem urina - celice v zastarelem urinu se bistveno spremenijo. Jasno je, da je za preventivne preglede najbolj sprejemljiva citološka preiskava sedimenta svežega urina, niti metoda aspiracijske biopsije niti metoda izpiranja sluznice mehurja ne moreta postati razširjena.

Citološka preiskava urinskega sedimenta, s katero smo identificirali zgodnjo onkološko patologijo mehurja pri profilaktično pregledanih kontingentih, ni upravičila naših upov – niti enkrat pri preiskavi 696 praktično zdravih oseb, od tega 185 (38,6 % ) je spadalo v rizično skupino in 511 (17,4%) - v kontrolo, ni bilo ugotovljenih znakov atipije celic, čeprav so študijo izvedli izkušeni citologi v centralnem citološkem laboratoriju mesta.

Izbrane laboratorijske raziskovalne metode

Z nekaterimi laboratorijskimi raziskovalnimi metodami je mogoče ugotoviti znano nagnjenost k pojavu te oblike raka. Mislimo na endogene dejavnike tveganja - oslabljeno presnovo triptofana s pojavom v urinu njegovih rakotvornih metabolitov - 3-hidroksiantranilne kisline, 3-hidroksikinurenina, kinurenina itd., Kot tudi povečana aktivnost urinske β-hialuronidaze.

Prisotnost rakotvornih metabolitov triptofana v urinu kaže na povečano tveganje za nastanek bolezni, pogosto se ugotovi pri bolnikih z rakom mehurja, vključno s ponavljajočimi se, in kaže na potrebo po korekciji presnove triptofana, tj. ukvarjajo se z biokemičnim preprečevanjem tumorjev.

Pri oblikovanju rizičnih skupin z epidemiološkimi testi prepoznavanje med njimi tistih s prisotnostjo rakotvornih presnovkov triptofana v urinu pomaga dodatno zožiti krog oseb. zahteva skrbno pozornost urologa.

Za določitev spektra metabolitov triptofana v urinu preiskovancev lahko uporabimo enodimenzionalno padajočo papirno kromatografijo. Ekstrakcija metabolitov se izvede enkrat iz 100 ml jutranjega urina po Makino metodi, modificirani po Wachsteinu, Lobelu.

Da bi to naredili, je urin nasičen z amonijevim sulfidom, da se oborijo beljakovine in soli. Nato se urin filtrira. Nastalemu filtratu dodamo 20 ml staljenega fenola in stresamo 20-25 minut na univerzalnem stresalniku. Nastala zmes se usede v liju ločniku, kjer se hitro ločita dve plasti: zgornja - rumena z rjavim odtenkom - plast fenola, spodnja - brezbarvna - plast urina.

Spodnji se odstrani, zgornjemu se doda 20 ml žveplovega etra in se močno stresa, da se izboljša raztapljanje fenola v etru. V tem primeru fenol preide v zgornjo, svetlejšo plast, v etru netopna vodna frakcija, ki vsebuje aromatske derivate triptofana, pa ostane v spodnjem delu lija ločnika v obliki temne oljnate plasti z volumnom 0,5-0,7 ml. .

To plast previdno vlijemo v izparilno posodo in posušimo v dimni komori. Posušen ekstrakt raztopimo v 0,2 ml destilirane vode in v količini 0,02 ml nanesemo na kromatografski papir ("Leningradskaya slow"), predhodno opran z mešanico etra in alkohola v razmerju 3:1.

Po sušenju se papir postavi v komoro, predhodno nasičeno s topili. Kot topilo uporabimo naslednji sistem topil: N-butil alkohol : ledocetna kislina : voda - 4:1:1. Pospeševanje poteka pri sobni temperaturi 20-24 ur.

Po tem se kromatogrami posušijo in obdelajo z Ehrlichovim reagentom (12 g paradimetilaminobenzaldehida + 20 ml 6NHCI + 80 ml etilnega alkohola). Takoj za tem se na kromatogramih pojavijo rumeno-oranžne lise, ki jih s tem reagentom proizvajajo sečnina in aromatski derivati ​​triptofana, ter modrikasto-lila lise, ki jih povzročajo indolni derivati ​​slednjega.

Na podlagi značilnega barvanja z Ehrlichovim reagentom, vrednosti Rf in primerjave s standardi omogoča opisana metoda identifikacijo naslednjih metabolitov triptofana - sečnine, triptamina, indikana, triptofana, 3-hidroksikinurenina, kinuranina, 3-hidroksiantranilne kisline. Slednji je najmočnejši endogeni karcinogen za uroepitelij, daje značilno rožnato-oranžno obarvanje z Ehrlichovim reagentom in Rf vrednostjo 0,75-0,8.

Za isti namen se izvaja določitev aktivnosti kialuronidaze v urinu. Toda ta metoda omogoča razlikovanje papiloma mehurja od invazivnega raka in jo večina avtorjev obravnava kot pomožno pri diagnozi epitelijskih tumorjev mehurja.

Aktivnost encimov v urinu se določi s splošno sprejeto metodo s fenolftaleinom. Da bi to naredili, se urin čez dan zbira pod tanko plastjo toluena, ki ga ščiti pred razpadom; nato se določi njegova skupna prostornina, specifična teža, prisotnost beljakovin, levkocitov, sladkorja in nujno opravi kultura mikroflore.

Slednje je potrebno zaradi dejstva, da so lahko različni mikroorganizmi, zlasti Escherichia coli, vir β-hialuronidaze. V primeru okužbe mehurja je urin izključen iz nadaljnjega testiranja.

Nato se iz vsakega vzorca vzame 4-5 ml urina, ki se centrifugira na centrifugi TsNL-2 pri 8-9 tisoč obratih 8-10 minut. Nato glede na število proučevanih vzorcev vlijemo 0,5 ml 0,1 M acitnega pufra v graduirane steklene centrifugalne epruvete s prostornino 10 ml, dodamo 0,5 ml 0,05 % raztopine substrata femolftalein glukuronida (Sigma). in šele čisto na koncu testa in predhodno centrifugiranega urina.

Dodatek alkalije je povzročil, da je pH zmesi enak 10,2-10,4, tj. Optimum, pri katerem pride do najbolj intenzivnega škrlatno rdečega obarvanja fenolftaleina, izločenega pod vplivom β-hialuronidaze v urinu. Nadaljnja določitev poteka na spektrofotometru SF-4 pri valovni dolžini 540 mm.

Obarvane vzorce primerjamo s tako imenovanimi »praznimi« kopelmi, ki so vsebovale enake raztopine in v enakih koncentracijah in količinah, vendar niso bile inkubirane in so bile pripravljene neposredno pred določanjem fenolftaleina v posameznem testnem vzorcu.

Količino sproščenega fenolftaleina določimo z vnaprej sestavljeno umeritveno lestvico, čemur sledi ponovni izračun na 1 ml na 1 uro inkubacije.

Stopnja encimske aktivnosti pri analizi urina zdravih posameznikov je bila od 0,4 do 1,1 in je v povprečju znašala 1,0 enote. Fishman pri 1 ml/uro. Pri papilomih mehurja se aktivnost encimov poveča za 1,2-1,4-krat. Poleg tega je to povečanje stalno in ni odvisno od tekočih ukrepov zdravljenja. Pri raku mehurja se aktivnost β-hialuronidaze v urinu poveča za najmanj 2-3, včasih pa tudi večkrat in doseže 5 Fishmanovih enot.

Pri določanju aktivnosti tega encima je treba najprej upoštevati sočasne bolezni pri bolnikih. To velja predvsem za hepatitis in pankreatitis, ki sama povzročita močno povečanje njegove aktivnosti v urinu. Drugič, treba je poudariti, da že sama cistoskopija, da ne omenjamo bolj zapletenih kirurških posegov, takoj povzroči povečanje ravni encimske aktivnosti v urinu v primerjavi z začetnimi podatki in šele po 8-10 dneh aktivnost β -lukuronidaza se vrne na prvotne številke.

Po mnenju M.N. Vlasova in sod., ki jih tukaj predstavljamo, ne opažajo nobenih razlik v povečanju ali zmanjšanju aktivnosti encimov glede na starost in spol bolnikov, pa tudi glede na metode kemoterapije ali obsevanja.

Avtorji uporabljajo to metodo kot pomožno metodo za diagnosticiranje epitelijskih tumorjev v mehurju. Lahko se priporoča tudi pri izvajanju ukrepov za biokemično preprečevanje raka mehurja, katerih cilj je zmanjšanje aktivnosti β-lukuronidaze v urinu za nadzor te aktivnosti.

Metode seveda zaradi delovne intenzivnosti in kompleksnosti ni mogoče uporabiti kot presejalno metodo, vendar je v rizičnih skupinah njena uporaba povsem upravičena za identifikacijo posameznikov, ki imajo pomemben endogeni dejavnik tveganja in v zvezi s tem potrebujejo ustrezne preventivne ukrepe. .

Prjaničnikova M.B.

Citološka preiskava urina ali analiza urina za atipične celice je študija strukture elementov te biološke tekočine pod mikroskopom. Material se oceni, da se ugotovi prisotnost ali odsotnost znakov maligne degeneracije in drugih patoloških procesov v celicah. Metoda omogoča pravočasno odkrivanje ali obvladovanje bolezni sečil.

Namen študije

Urin se odda na citologijo v naslednjih pogojih:

• sum na neoplazmo v mehurju, pa tudi na ledvicah, ureterjih, sečnici, prostati (prostati). Indikacija je hematurija - prisotnost krvnih celic - rdečih krvničk - v urinu. V nekaterih primerih je analiza predpisana za težave z uriniranjem;
• nadzor morebitne ponovitve raka sečil;
• nezmožnost uporabe kolposkopije in drugih metod za preučevanje stanja reproduktivnega sistema pri ženskah (device, med menstruacijo, z obsežnim vnetjem). V tem primeru se pregledajo celice urina.

Laboratorijska citološka preiskava se izvaja za diagnosticiranje raka genitourinarnega sistema.

S citologijo urinskega sedimenta ni mogoče diagnosticirati benignih tumorjev mehurja, kot so lipom, fibrom, leiomiom, nevrofibromatoza, kot tudi patološke proliferacije tkiva - endometrioze. Vendar pa metoda omogoča pravočasno prepoznavanje papiloma, preprečevanje njihove degeneracije in odkrivanje rakavih celic.

Kako se pripraviti na citološki test urina

Študija ne zahteva posebne priprave. Pred posegom je priporočljivo opraviti higieno genitalij in nato zbrati urin v sterilno posodo s hermetično zaprtim pokrovom.

Vzorec je priporočljivo dostaviti v laboratorij v dveh urah.

Čas zbiranja tekočine je odvisen od smeri študije:

• Za analizo hormonskih sprememb v ženskem menstrualnem ciklu je potreben prvi odmerek jutranjega urina, ki vsebuje največ celičnih elementov, včasih pa se uporabi tudi material, odvzet ob drugih urah dneva.
• Za odkrivanje atipičnih celic, nasprotno, ni priporočljivo preučevati jutranjega urina; bolje je počakati 3 ure po prvem uriniranju in urinirati v posodo, zbrati vso izločeno tekočino.
• Najbolj natančne rezultate za tumorje mehurja dobimo s citologijo urina, izoliranega z aspiracijo skozi kateter - ko tekočino izsesamo z brizgo iz votline organa.

Ta metoda ocenjuje človeško mikrofloro

Kaj vam bo povedal citološki izvid?

Za atipične celice

Diagnoza novotvorb urinarnega trakta temelji na luščenju celic teh tumorjev in njihovem sproščanju v urin:

• Pri benignem procesu so v materialu identificirane posamezne celice ali celotne plasti prehodnega epitelija (plast, ki obdaja notranjo površino mehurja), katere struktura je podobna normalnemu epiteliju organa. Oblika teh elementov je pogosto vretenasta, skupaj z njimi se v urinu zabeleži prisotnost rdečih krvnih celic.
• Pri raku mehurja imajo celice prehodnega epitelija izrazite znake atipije - njihova zgradba se celo razlikuje med seboj. Hkrati vzorec vsebuje veliko število rdečih krvničk in nekrotičnih mas.

V laboratoriju iz materialnega sedimenta pripravimo nativne (nemodificirane) brise in obarvamo s posebnimi metodami. Nato pod mikroskopom preučujemo morfološko sestavo celic. Poleg prisotnosti benignega ali malignega tumorja citološka analiza pomaga odkriti druge lezije urinarnega trakta, na primer vnetni proces.

Poleg tega se citologija izvaja za tiste bolnike, ki so v zadnji fazi zdravljenja bolezni.

Rezultati študije za atipične celice so lahko naslednji:

• Neustrezen vzorec - zbrani urin ni primeren za testiranje (vsebuje premajhno število celic ali nečistoč, ki jih v materialu ne bi smelo biti). Diagnozo je treba ponoviti.
• Test je negativen – v urinu ni rakavih celic.
• Atipična citologija urina - nekaj sprememb v celicah vzorca, vendar brez malignih znakov.
• Sumljiva citologija – celični material ni normalen, možen rak.
• Pozitiven test pomeni, da so v urinu maligne tumorske celice.

Občutljivost metode je približno 90%. Vendar pa lahko študija vsebuje napake, na katere vplivajo infekcijske lezije sečil, nezadostno število celic, kamni v mehurju ali ledvicah, intravezikalne instilacije (infuzija zdravil). Če je test pozitiven, se za potrditev diagnoze zatečejo k cistoskopiji - biopsiji (odščipnitvi) tkiva mehurja, ki ji sledi mikroskopski pregled.

Prednost te analize je, da citološki test ne zahteva veliko časa v primerjavi z drugimi študijami

Za hormonska nihanja

V tem primeru se proučujejo tudi naravni in obarvani brisi, nato pa se v njih prešteje število celic različnih vrst, vključno z:

• bazalni;
• vmesni;
• bazofilni (keratinizirajoči);
• acidofilni (keratiniziran);
• nenuklearni acidofilni.

Posebna pozornost je namenjena slednjemu - število teh elementov v različnih dneh cikla je 2-20% in kaže na sproščanje hormonov iz nadledvičnih žlez (več kot iz jajčnikov).

Drugi indikatorji

Mikroskopija urinskega sedimenta je del splošne analize urina in lahko razkrije druge patologije. Na primer, če je raven levkocitov višja od normalne, govorijo o vnetnem procesu, odkrivanje bakterij ali gliv pa kaže na okužbe sečil.

Citološka preiskava urina nam omogoča ugotavljanje tumorskih lezij urinskega sistema, pa tudi netumorskih sprememb v epiteliju in je dodatna metoda za zgodnjo diagnozo urotelijskega raka, vključno z rakom visoke stopnje (HGC). Neinvazivnost in dostopnost citološke metode omogoča spremljanje bolnikov z anamnezo raka z namenom odkrivanja recidivov bolezni.

Sopomenkeangleščina

Citološki pregled.

Raziskovalna metoda

Citološka metoda.

Kateri biomaterial se lahko uporabi za raziskave?

Dnevni urin.

Kako se pravilno pripraviti na raziskavo?

• 24 ur pred testom iz prehrane izločite alkohol.
• Izogibajte se (po posvetu z zdravnikom) jemanju diuretikov 48 ur pred zbiranjem urina.

Splošne informacije o študiju

Urin je v bistvu biološki produkt razgradnje in izločanja presnovnih procesov v telesu; po njem lahko presojamo tako stanje telesa kot celote kot prisotnost določenih bolezni, procesov in patologij.

Obstaja več vrst laboratorijskih preiskav urina. Biokemična, klinična, dnevna analiza urina po testu Nechiporenko, Zimnitsky, Reberg, Sulkovich, bakteriološka kultura - vsaka metoda ima določene indikacije in značilnosti izvajanja. Običajno jih lahko razdelimo na specifične in nespecifične. Zgornje metode so med prvimi, nespecifične metode - imunokromatografske in kemijsko-toksikološke - pa omogočajo ugotavljanje prisotnosti in odstotka alkoholnih snovi.

Citološka preiskava urina ali analiza urina za atipične celice je študija strukture elementov urina pod mikroskopom. Biomaterial se oceni, da se ugotovi prisotnost ali odsotnost znakov maligne degeneracije in drugih patoloških procesov v celicah. Analiza omogoča oceno značilnosti morfološke zgradbe posameznih celic. Zahvaljujoč temu lahko zdravnik naknadno potrdi ali ovrže primarno diagnozo in po potrebi predpiše dodatni zdravniški pregled. To je eden najučinkovitejših načinov za odkrivanje malignih tumorjev in raka. Študija pomaga tudi pri prepoznavanju infekcijskih in vnetnih procesov.

Citološki pregled se razlikuje po tem, da se izvaja na celični ravni. Študija celične morfologije z mikroskopom se izvaja za identifikacijo malignih tumorjev ali onkoloških tvorb. Ocenjuje se stanje človeške mikroflore, kaže se prisotnost ali odsotnost patoloških infekcijskih in drugih procesov, lahko se določijo naslednje vrste bolezni: rak prostate, rak mehurja, rak ureterjev in sečnice, rak ledvic. Metoda velja za enega najučinkovitejših načinov za odkrivanje rakavih degeneracij v začetni fazi.

Za kaj se uporablja raziskava?

• Oceniti značilnosti morfološke strukture celičnih elementov v urinu, prepoznati bolezni genitourinarnega sistema.

Kdaj je predviden študij?

• Če sumite na prisotnost urotelijskega raka;
• opredelitev skupine bolnikov z velikim tveganjem za nastanek raka VZZ za nadaljnje preiskave;
• pregled bolnikov z benignimi procesi (urolitiaza, cistitis, benigna hipertrofija prostate, ledvična bolezen, diabetes mellitus, invertni papiloma, hiperplazija, nefrogeni adenom);
• pojasnitev diagnoze obstoječe onkologije sečil (karcinom mehurja);
• hematurija;
• ocena učinkovitosti zdravljenja;
• spremljanje rezultatov operacije.

Kaj pomenijo rezultati?

Citološki izvid je opis splošne citološke slike.

Rezultat je treba interpretirati v skladu s kliničnimi znaki in anamnezo.

Bolniki z urotelijskim karcinomom VZZ v anamnezi in brez kliničnih znakov tumorja imajo lahko nediagnosticiran tumor v zgornjih sečilih. Pri takšnih bolnikih odkrivanje v citospektivih atipične urotelne celice (AUC) pomeni veliko verjetnost kliničnega odkrivanja tumorja visoke stopnje.

Če se odkrijejo atipične celice in / ali značilni klinični simptomi, ki kažejo na prisotnost maligne neoplazme, je priporočljivo izvesti nadaljnjo ciljno laboratorijsko in instrumentalno diagnostiko (cistoskopija, biopsija).



Splošna analiza urina z mikroskopijo sedimenta

Ugotavljanje tveganja za nastanek in neugoden potek urotelijskega raka sečnega mehurja, določanje p16ink4a v urinskem sedimentu.

Antigen raka mehurja (UBC)

Kdo naroča študijo?